多房棘球蚴LDH基因的克隆表达及免疫原性研究

摘要：

目的 克隆表达青海省多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)乳酸脱氢酶(lactate deh ydrogenase,LDH)基因,鉴定EmLDH重组蛋白的免疫原性,初步评价其免疫诊断价值.方法 采用RT-PCR方法克隆EmLDH基因,将其连接入pET15b表达载体中,构建重组表达质粒pET15b-EmLDH,转化至E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞进行诱导表达.通过SDS-PAGE检测重组蛋白的表达形式,Ni-IDA树脂亲和层析纯化重组蛋白.通过Western blotting法鉴定EmLDH重组蛋白的免疫原性,ELISA法检测泡型包虫病患者(57例)、囊型包虫病患者(33例)和正常人(50例)血清,初步评价EmLDH重组蛋白的免疫诊断效果.结果 成功克隆了EmLDH基因并表达纯化出相应的重组蛋白.Western blotting结果显示,EmLDH重组蛋白可被泡型和囊型包虫病患者血清识别,而不被正常人血清识别.ELISA结果显示,EmLDH重组蛋白对泡型和囊型包虫病患者血清的诊断敏感性分别为84.21％和84.85％.结论 EmLDH重组蛋白具有较高的免疫原性,对包虫病具有较好的免疫诊断价值.

关键词：多房棘球蚴、LDH基因、克隆、表达、免疫原性

所属期刊栏目：33

分类号：R383.3(医学寄生虫学)

资助基金：青海省科技项目No.2016-ZJ-746资助 Supported by the Science and Technology Project of Qinghai Province 2016-ZJ-746

在线出版日期：2018-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：967-971