猪链球菌2型转录调控因子Rex原核表达及体外结合活性分析

摘要：

目的 克隆猪链球菌2型转录调控因子Rex的编码基因进行原核表达和纯化,对其进行生物信息学分析和体外结合活性测定.方法 PCR扩增猪链球菌2型强毒株SS2-1的Rex基因编码区,将其克隆入pET28a质粒中,再将pET28a-Rex重组质粒转入大肠杆菌表达菌BL21 (DE3)中,重组菌株经IPTG诱导后能表达出猪链球菌Rex蛋白;通过体外凝胶迁移实验(EMSA)对Rex蛋白与DNA的结合活性进行分析.结果 成功地原核表达并纯化了Rex重组蛋白.Rex蛋白与自身启动子Prex特异性结合,高浓度的NADH抑制两者的结合活性,而NAD+对结合没有影响.结论 通过体外结合试验发现Rex是通过响应NADH/NAD+平衡来调控自身基因的表达.

关键词：猪链球菌、Rex、调控因子

所属期刊栏目：33

分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：the National Genetically Modified Organisms Breeding Major Projects of China2014ZX0800946B-002;the Special Fund for Agro-scientific Research in the Public InterestNo.201303041国家转基因生物新品种培育重大专项子课题2014ZX0800946B-002;国家公益性行业科研专项201303041

在线出版日期：2018-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：680-684