人源抗EV71病毒中和表位SP70的Fab抗体研制

摘要：

目的 构建人源抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库,筛选具有中和活性的人源单克隆抗体,为EV71感染引起的手足口病临床诊断及治疗奠定基础.方法 从成人志愿者抗凝血中分离外周淋巴细胞,提取总RNA并逆转录为cDNA.以cDNA为模板,用人源IgG Fab段基因引物扩增轻链及重链Fd区基因,分步克隆至pComb3载体,构建Fab噬菌体抗体库.以SP70为抗原对Fab噬菌体抗体库进行富集筛选,将获得的重组噬菌体感染XL1-Blue菌并诱导表达,用SP70对诱导表达的菌上清进行筛选.结果 共获得3株轻、重链基因组合序列不同的克隆,且这3株Fab抗体可特异性结合SP70多肽.结论 成功构建人源抗EV71病毒Fab噬菌体抗体库,并从中筛选出3株针对EV71病毒结构蛋白VP1上中和线性表位SP70的特异性人源Fab抗体,为研发新的手足口病诊断和治疗工具奠定基础.

关键词：EV71病毒、手足口病、噬菌体展示技术、人源化抗体、抗体Fab段、SP70

所属期刊栏目：32

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2011AA02A114;福建省自然科学基金2010J01115;the National High-tech R & D Program of China2011AA02A114;the Natural Science Foundation of Fujian Province2010J01115

在线出版日期：2016-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：683-688