快速检测猪链球菌的环介导等温扩增方法

摘要：

目的 建立猪链球菌(S.suis)的环介导等温扩增方法(LAMP).方法 通过BLASTn序列比对确定较为保守的S.suis种特异基因,用软件PrimerExplorer V4设计针对靶基因的LAMP试验引物;分别用煮沸法和试剂盒提取法提取基因组做敏感性试验,并用62株非S.suis菌株评价了实验的特异性;再用100株分离自不同地区不同时间的S.suis菌株评价该方法的可靠性.结果 确定了S.suis种特异性基因dnaN为靶基因,并针对该基因建立了检测S.suis的LAMP方法.敏感性实验中,每个反应的检测下限是31.25 fg纯DNA,相当于14个拷贝;煮沸法的检测下限是每个反应27 CFU.在对62株非S.suis菌株与有争议的S.suis菌株的特异性评价实验中,未发现有假阳性.结论 成功建立了针对dnaN基因检测S.suis的LAMP方法.

关键词：猪链球菌、dnaN、LAMP

所属期刊栏目：32

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：中国科技部资助项目No.2013ZX10004221,No.2013ZX10004216-001-002和No.81261120559 Supported by grant from the Minister of Science and Technology,People's Republic of China .2013ZX10004221,2013ZX10004216-001-002 and 81261120559

在线出版日期：2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：539-546