利用融合PCR技术和T载体克隆技术构建结核分枝杆菌PhoPR双组份系统缺失突变载体

摘要：

目的 基于融合PCR技术(SOE-PCR)、T载体克隆技术,构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)双组份系统缺失突变载体的方法.方法 利用SOE-PCR技术,将PhoP、PhoR和PhoPR基因上、下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合,构建PhoP、PhoR和PhoPR突变片段,然后将突变片段直接与T载体连接,将其转入E.coli DH5α感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得MTB PhoP、PhoR和PhoPR缺失突变载体.结果 成功构建MTB PhoPR双组份系统缺失突变载体,与传统方法相比,效率高、周期短.结论 基于融合PCR技术和T载体克隆技术成功构建MTB PhoPR双组份系统缺失突变载体,为下一步构建MTB突变株以及相关研究奠定基础.

关键词：结核分枝杆菌、PhoPR双组份系统、缺失突变株、构建

所属期刊栏目：32

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：the National Natural Science Foundation.81260261 and 81160192;the High-Level Personnel Scientific Research Projects of Shihezi University No.RCZX201446国家自然科学基金项目81260261,81160192;石河子大学高层次人才启动专项RCZX201446

在线出版日期：2016-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：276-280