淡色库蚊氨肽酶N基因的克隆及生物信息学分析

摘要：

目的 克隆淡色库蚊Bt毒素受体氨肽酶N(Aminopeptidase N,APN)基因,并对基因及编码蛋白进行生物信息学分析.方法 提取淡色库蚊RNA,通过RT-PCR扩增氨肽酶N基因的全长cDNA序列,纯化PCR产物连接至pMD19-T载体,阳性重组质粒经PCR鉴定后进行基因测序.生物信息学分析APN基因的序列同源性及编码蛋白的结构特征.结果 该基因cDNA序列全长为1 383 bp(含终止密码子),编码460个氨基酸,与致倦库蚊XM_001862270.1序列的同源性为100％.预测蛋白质分子量为52.9 kDa,等电点为4.98.前21个氨基酸为N-末端的信号肽,存在2个N-糖基化位点(93 NLT95和169 NVS171).具有肽酶家族M1的序列特征、锌结合位点HEXXH和谷氨酸锌化氨肽酶的保守结构GAMEN.结论 成功克隆了淡色库蚊氨肽酶N基因并对APN蛋白进行生物信息学分析,为进一步探讨淡色库蚊APN的功能及Bt毒素作用机制奠定了基础.

关键词：淡色库蚊、氨肽酶N、克隆、生物信息学

所属期刊栏目：32

分类号：Q969.44(昆虫学)

资助基金：the National Natural Science Foundation of China No.81271877国家自然科学基金项目81271877

在线出版日期：2016-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：240-245