中缅边境恶性疟原虫对青蒿素类药体外敏感性检测和K-13基因突变的相关性研究

摘要：

目的 研究中缅边境恶性疟原虫对青蒿素类药物抗药机制.方法 收集分离自2008-2010年中缅边境确诊为恶性疟病人体内的疟原虫,共34株,进行体外培养;提取原虫血DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)方法,扩增PF3D7-1343700(K-13)基因,对目标基因进行全基因测序,检测K13基因变异情况;依据基因有无变异分为两组,对比两个组别疟原虫对3种抗疟药青蒿琥酯(Artesunate,AS)、双氢青蒿素(Dihydroartemisinine,DHA)和青蒿素(artemisinin,ART)的半效抑虫浓度(IC50值),并与野生株3D7做对比;随后将这些疟原虫在环状体时期暴露于大剂量的DHA下,6h后洗尽药物,再经过66 h培养后涂片,计算生存率(RSA),比较变异株和非变异株之间有无差异.结果 检测发现疟原虫K13基因存在137-142位点NN插入(占82.4％),另有E252Q、F446I、C469Y、R539T、P553L、P574L、H719N位点突变,均伴有NN插入,其中F446I(占44.1％).病人株的IC50值和野生株无统计学差异(P＞0.05),但病人株的RSA高于野生株(P＜0.05);有K13基因变异组和无变异组对AS、DHA、ART的IC50值无统计学差异(P＞0.05),但有基因变异组的RSA高于无基因变异组(P＜0.05).结论 本研究结果发现K-13基因变异与恶性疟原虫对青蒿素类药物抗药性可能相关.

关键词：恶性疟原虫、青蒿素类药物、耐药机制、PF3D7_1343700

所属期刊栏目：32

分类号：R382.3(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金U1202226,81161120421,31260508;云南省科技厅—昆明医科大学应用基础研究联合专项2015FB034,2014FB005;昆明医科大学创新基金2014-D2;云南公共卫生与疾病防控协同创新中心项目2014YNPHXT05;云南省自然科学基金2012FB153;张艳梅,吴艳瑞同等贡献 Supported by the National Natural Science Foundation of China.U1202226,81161120421,31260508;the joint project from Science and Technology Department of Yunnan Province and Kunming Medical University.2015FB034,2014FB005;the Innovation Foundation of Kunming Medical University2014-D2;the project of Yunnan Provincial Collaborative Innovation Center of Public Health and Disease Prevention and Control2014YNPHXT05;the National Natural Science Foundation of Yunnan Province2012FB153

在线出版日期：2016-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：219-223