环介导等温扩增技术在嗜水气单胞菌检测中的应用

摘要：

目的 建立环介导等温扩增技术(Loop mediated isothermal amplification,LAMP)对嗜水气单胞菌检测的方法,并用临床标本对该方法进行评价.方法 根据嗜水气单胞菌desA基因的保守序列设计特异性引物,利用参考质粒评价该检测体系的灵敏度;用30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌评价该检测体系的特异性;用粪便模拟样本以及临床样本评价该检测体系的临床检测的可行性.结果 LAMP检测体系对嗜水气单胞菌重组质粒的检测灵敏度为1×102拷贝/反应体系;LAMP检测体系在检测30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现假阳性;LAMP检测体系在粪便模拟标本中的检测下限为5×103 CFU/g;通过与qPCR技术相比较,LAMP具有更高的灵敏度以及更优秀的临床标本的检测能力.结论 本研究建立的LAMP方法是首次将LAMP技术运用到了嗜水气单胞菌的检测,所需仪器设备简单,可作为一种快速的筛查方法在临床检验和基层实验室应用.

关键词：嗜水气单胞菌、LAMP、qPCR

所属期刊栏目：32

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：the National Major Science and Technology Project of Prevention and Control in Significant Infectious Diseases2013ZX10004-101;国家重大传染病防治科技重大专项2013ZX10004-101

在线出版日期：2016-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-6,12