猪带绦虫重组 BCG-TSOL18疫苗构建及其表达

摘要：

目的：构建猪带绦虫重组BCG‐TSOL18疫苗，研究TSOL18基因在BCG中的表达情况。方法通过酶切的方法从重组质粒pGEX‐TSOL18获取猪带绦虫TSOL18基因，将其定向克隆到大肠杆菌‐分枝杆菌穿梭表达质粒pMV261中，构建猪带绦虫重组质粒pMV261‐TSOL18，进行酶切、PCR和测序鉴定；再将其电穿孔转化入BCG ，构建猪带绦虫重组BCG‐TSOL18疫苗，进行PCR鉴定；SDS‐PAGE和Western blot分析 TSOL18基因在BCG中的表达情况。结果通过酶切成功获得了393 bp的TSOL18基因片段；酶切、PCR和测序鉴定证明成功构建了猪带绦虫重组质粒pMV261‐TSOL18；PCR鉴定证实猪带绦虫重组质粒pMV261‐TSOL18成功转入BCG中，提示猪带绦虫重组BCG‐TSOL18疫苗构建成功；SDS‐PAGE分析发现在相对分子质量（M r）约为14．7 kD处有明显的TSOL18目的蛋白条带，Western blot证实表达的TSOL18目的蛋白能被兔抗血清和囊虫病猪血清所识别。结论成功构建了猪带绦虫重组BCG‐TSOL18疫苗，TSOL18基因能够在BCG中成功表达，表达的TSOL18重组蛋白具有特异的抗原性，为该疫苗的进一步研究奠定了基础。

关键词：猪带绦虫、重组BCG-TSOL18疫苗、构建、表达

分类号：R383.33(医学寄生虫学)

资助基金：贵州省科技厅社会发展攻关项目黔科合SY字[2011]3038号Supported by the Social Research Project of Science and Technology Department of Guizhou Province ．SY [2011]3038

在线出版日期：2015-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：952-956,962