香港海鸥形菌多重PCR及嵌合荧光PCR检测方法的建立与应用

摘要：

目的 建立香港海鸥形菌(Laribacer hongkongensis,LH)的多重PCR(multi-PCR)及嵌合荧光法(SYBR GreenⅠ)PCR检测方法,并对其在临床及环境微生物方面的应用前景进行评价.方法 通过对62株香港海鸥形菌16S RNA基因和16S-23S rRNA基因间隔区(16-23S rRNA intergenic spacer region,ISR)进行PCR扩增和多序列比对,设计两对特异性引物,建立多重PCR体系,用15种细菌性腹泻标准菌株及临床菌株进行PCR特异性和敏感性检验;并在此基础上针对两对引物分别用嵌合荧光PCR法进行浓度梯度检测,以确定最低检测限.结果 香港海鸥形菌多重PCR法特异性为100％,最低检出限为5×103 CFU/mL菌液;而嵌合荧光PCR法两对引物的最低检出限均达到5×102 CFU/mL菌液.结论 该法的建立为临床及环境微生物学提供了一种快速和灵敏的香港海鸥形菌检测手段.

关键词：香港海鸥形菌、多重PCR、嵌合荧光PCR

所属期刊栏目：31

分类号：R446.5(诊断学)

资助基金：浙江省重点科技创新团队项目2011R50021;杭州市科技计划引导项目2014-2;the Program for Zhejiang Leading Team of Science Technology Innovation and the Science and Technology Guiding Projects of Hangzhou city2014-2

在线出版日期：2015-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：659-662,668