裂谷热病毒Gn蛋白主要抗原区的表达、纯化及抗原性分析

摘要：

目的 通过原核表达系统制备裂谷热病毒Gn片段主要抗原区蛋白,获取纯化蛋白,并分析抗原性.方法 将合成的裂谷热Gn基因用PCR的方法扩增具有保护性抗原表位的两段Gn1和Gn2,并将其定向插入原核表达质粒pColdⅠ中,构建重组表达质粒pCold Ⅰ-Gn1和pCold Ⅰ-Gn2,并将重组质粒转化到BL21 (DE3)感受态中,以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白和表达量,并利用His-tag Ni柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白.结果 所构建的质粒pColdⅠ-Gn1和pCold Ⅰ-Gn2序列正确,SDS-PAGE检测到目的蛋白,Western-blot显示截断的Gn蛋白具有很好反应原性.结论 成功纯化了裂谷热病毒Gn主要抗原区的表达蛋白.

关键词：裂谷热病毒、Gn蛋白、原核表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：31

分类号：R183.5(流行病学与防疫)

资助基金：国家科技支撑计划2013BAD12B05;国家自然科学基金31302116;上海高校青年教师培养资助计划ZZnlzl2003;上海农林职业技术学院院级科研项目091227;grants from the National Science and Technology Support Program of China2013BAD12B05;the National Natural Science Foundation of China31302116;the Development Program for Young Teachers in Shanghai CollegesZZnlzl2003;the Science Foundation of Shanghai Vocational and Technical College of Agriculture and Forestry091227

在线出版日期：2015-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：607-611