常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒方法的建立及其应用

摘要：

目的 建立GⅠ、GⅡ型诺如病毒的常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测方法,并对两种方法进行应用.方法 优化筛选出最佳PCR反应体系与反应条件,并从灵敏性、特异性、临床样品检测等方面对建立的方法进行比较与评价.结果 该两种方法特异性强,与札幌病毒、轮状病毒、星状病毒、腺病毒同时检测无交叉反应,同一体系内GⅠ、GⅡ型诺如病毒相互之间没有干扰;常规RT-PCR最低检测限为103 copies/μL,荧光定量RT-PCR最低检测限为102 copies/μL;对180份临床粪便样品进行检测,常规RT-PCR则检测率为5.56％(10/180),符合率达97.22％,荧光定量RT-PCR检测率为8.33％(15/180),符合率达100％;对15份阳性样品测序分析,证实均为诺如病毒.结论 建立的常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR均可用于诺如病毒的快速检测,荧光定量RT-PCR更为灵敏.

关键词：常规RT-PCR、荧光定量RT-PCR、GⅠ、GⅡ型诺如病毒

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分类号：R450(治疗学)

资助基金：国家“863计划”2012AA101601;the National Programs for High Technology Research and Development of China2012AA101601

在线出版日期：2015-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：602-606,611