PCR-HRM 方法快速鉴定布鲁氏菌的初步应用

摘要：

目的：本研究旨在建立准确、快速地鉴定布鲁氏菌菌种及生物分型的PCR‐HRM （高分辨率熔解曲线）方法。方法根据目的基因序列，参考文献合成6对基因扩增引物（1对布鲁氏菌属特异引物，5对种间特异引物），应用PCR‐HRM 方法鉴定布鲁氏菌属6个种19个生物型的标准菌株，并初步应用到临床分离的35株布鲁氏菌中。结果采用布鲁氏菌属特异引物（Bspp），6个种19个生物型的标准菌株均扩增出同样形状的溶解曲线，与其它对照菌株的曲线不同；采用5对种特异引物，6个种的标准菌株均有特征性PCR‐HRM曲线；临床分离的35株布鲁氏菌的PCR‐HRM 曲线与羊种布鲁氏菌标准菌株的一致。结论该研究采用的PCR‐HRM分析方法，获得了布鲁氏菌属及6个种标准菌株的不同曲线图，可准确鉴定临床分离的羊种布鲁氏菌，可用于临床微生物实验室疑似布鲁氏菌感染的初步鉴定。

关键词：布鲁氏菌、分子鉴定、高分辨溶解分析(PCR-HRM)

分类号：R378.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：辽宁省科技攻关计划资助项目2011225021;国家科技重大专项课题2009ZX10004-209联合资助梁雪妮和崔步云同等贡献Supported by the grant from the Key Technologies R&D Pro-gram of Liaoning Province．2011225021;the Major National Science and Technology Special Project．2009ZX10004-209

在线出版日期：2015-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：255-259