交叉引物恒温扩增法检测甲型 H1N1流感病毒及临床应用

摘要：

目的：建立交叉引物恒温扩增（Cross Priming Amplification ，CPA ）技术对甲型 H1N1流感病毒进行检测的方法，并对该方法通过临床标本进行评价。方法根据甲型H1N1流感病毒的保守序列设计特异性引物，并在同一温度下实现RNA的逆转录和DNA扩增，该扩增产物可通过全封闭式核酸检测装置进行检测。14份健康人咽拭子标本、7个其他呼吸道病毒和6个虫媒病毒株被用来检测CPA反应的特异性；已知病毒滴度的甲型 H1N1毒株进行对照梯度稀释，以测试CPA的敏感性；102份甲型H1N1临床咽拭子标本为检测对象，评估其临床的检测的可行性。结果 CPA反应未出现对健康样本以及其他病毒产生交叉反应；对已知滴度的病毒进行梯度稀释检测，证明CPA的敏感性为10拷贝／μL 。对甲型 H1N1流感临床病例发病1～3 d临床标本新建检测方法的检出率为100％，4～6 d临床标本检出率为79．31％，≥7 d临床标本检出率为9．09％。讨论 CPA具有较高的敏感性、特异性，对设备要求低，适合基层医疗单位对甲型H1N1流感发病早期诊断使用。

关键词：甲型 H1N1流感病毒、交叉引物恒温扩增技术、临床应用

分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家科技重大专项2012ZX10004-213-005;广州市医药卫生科技项目20131A011115，201102A212006;广州市科技和信息化局项目2012Y2-00020;广东省科学技术厅项目2012B040304002;广州市医学重点学科建设项目2013-2015-07联合资助．20121Y2-00020;the Science and Technology Program of Guangdong Province．2012B040304002;the Project for Key Medicine Discipline Construction of Guangzhou Municipality．2013-2015-07

在线出版日期：2015-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：208-211,215