10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.03.001
分支杆菌噬菌体 Leo 生物学特性及抗结核作用
目的:明确分支杆菌噬菌体L eo的生物学特性及其抗结核作用,为“鸡尾酒疗法”筛选候选噬菌体。方法采用双层平板法制备噬菌体Leo ,观察噬菌斑形态;电镜观察噬菌体颗粒形态;提取噬菌体DNA ,限制性内切酶酶切分析确定其核酸类型;以不同MOI扩增噬菌体Leo ,确定最佳MOI及最低MOI;通过一步生长曲线,确定潜伏期及裂解量;采用终点滴定反浊法测定耻垢分支杆菌对噬菌体L eo的耐受突变率;检测噬菌体L eo对酒精、温度的耐受性及在不同p H下的裂解能力;通过体外杀结核分枝杆菌实验,明确噬菌体L eo对结核分枝杆菌的杀灭作用。结果 L eo噬菌斑圆形透明,边缘清晰,含对称的多面体头部,直径(70±3.0)nm ,可弯曲的尾部,尾长(211±31.7)nm ;其基因组能被限制性内切酶 HindⅢ、BglⅠ切开;最佳MOI为0.00001,最低MOI为0.0001,潜伏期为150 min ,裂解量74,耐受突变率为10‐7。Leo对温度、酒精敏感,在pH 7.4和pH 5.0时均能裂解宿主菌。Leo作用于结核分支杆菌72 h后,Leo组菌量明显低于空白组(P <0.05)。结论分支杆菌噬菌体Leo属长尾噬菌体科,双链DNA噬菌体,能够杀灭结核分支杆菌,可作为“鸡尾酒疗法”的候选噬菌体。
分支杆菌噬菌体Leo、生物学特性、结核分支杆菌
R378.91(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家“十二五”重大专项课题2012ZX10003009;国家临床重点专科专项经费资助项目No .2012-649资助,江莉莎与邬亭亭对本文同等贡献National Key Clinical Specialty Foundation.2012-649
2015-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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