细粒棘球蚴 EG95s 重组蛋白串联表达免疫原性分析

摘要：

目的：比较、分析EG95s重组蛋白的免疫原性。方法本研究分别诱导表达含有1、2、3拷贝EG95s的pET-1EG95s、pET-2EG95s和pET-3EG95s重组质粒，并用His亲和纯化HIS-1EG95s、HIS-2EG95s和HIS-3EG95s3种重组蛋白。再以相同的免疫程序分别免疫8周龄BALB/c小鼠，通过间接ELISA方法检测小鼠体内抗体水平的变化分析其免疫原性。结果经过改造的EG95s重组蛋白：HIS-1EG95s、HIS-2EG95s、HIS-3EG95s均保留了免疫原性，能诱导小鼠产生特异性抗体。3者抗体水平的比较结果显示 HIS-1EG95s首次免疫后1周产生的抗体水平明显高于HIS-2EG95s、HIS-3EG95s ，但免疫后2周开始，HIS-3EG95s抗体水平超过HIS-1EG95s组，并在二次免疫及三次免疫后持续高于 HIS-1EG95s组。免疫后最终抗体效价显示 HIS-1EG95s和 HIS-2EG95s两组均为1∶819200，而 HIS-3EG95s组为1∶1638400。 HIS-1EG95s、HIS-2EG95s、HIS-3EG95s均诱导机体产生IFN-γ，但差异不显著，与羊包虫阳性血清反应结果显示 HIS-1EG95s的反应性均显著低于HIS-2EG95s和 HIS-3EG95s。结论 HIS-1EG95s、HIS-2EG95s与 HIS-3EG95s均具有很好的免疫原性，虽 HIS-EG95s在免疫初期免疫效果好，但串联3拷贝的EG95s后使得重组蛋白免疫效果更持久，更有利于产生更长效的免疫保护作用。本研究为羊包虫病疫苗的研制及免疫预防奠定了科学基础。

关键词：细粒棘球蚴、EG95s、免疫原性

分类号：R383(医学寄生虫学)

资助基金：the Scientific Research on Public Causes．&nbsp,201303042;the Agricultural Science and Technology Innovation Program No ．ASTIP-IAS-11 Corresponding author Zhu Hong-fei ，Emailbioclub＠ vip ．sina ．com ．cn

在线出版日期：2014-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：843-847