C2株蓝氏贾第鞭毛虫组蛋白H3基因的克隆表达与基因分析

摘要：

目的 克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,与WB株蓝氏贾第鞭毛虫进行同源分析,构建C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树.方法 PCR扩增获取H3组蛋白基因,构建pGM-T-H3重组载体,转化E.coli TOP10感受态宿主细胞,挑选阳性克隆并进行序列分析,利用限制性内切酶NcoⅠ和XhoⅠ构建pET28a(+)-H3重组载体,转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导组蛋白H3表达,Western blotting鉴定表达,与美国WB株蓝氏贾第鞭毛虫及模式生物H3组蛋白基因和蛋白序列进行同源分析.结果 成功克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,同源比对结果显示C2株蓝氏贾第鞭毛虫基因序列与美国WB株完全一致,但与其他现存真核生物亲缘关系较为疏远.结论 C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树分析表明贾第虫H3组蛋白基因在进化过程中与其他物种分化较早,本研究结果为进一步研究蓝氏贾第鞭毛虫的生物进化地位提供有价值的实验资料.

关键词：C2株蓝氏贾第鞭毛虫、克隆、表达、同源性分析、分子进化树

所属期刊栏目：30

分类号：R382(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30970313;唐山市科技支持计划项目12140209A-33;河北省青年科学基金C2012401039;河北联合大学培养基金GP201308;the National Natural Science Foundation of China30970313;the Scientific and Technological Support Projects from Tangshan,ChinaGrant 12140209A-33;the Youth Science Fund Project in Hebei ProvinceC2012401039;the Hebei United University Training FundGP201308

在线出版日期：2014-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：568-574