抗疟原虫单抗M26-32 IgM的单体化及其免疫学特性研究

摘要：

目的 改造IgM类抗疟原虫单抗M26-32为单体IgM亚单位,胶体金标记天然和改造后两种M26-32用于检测疟原虫抗原.方法 复苏培养M26-32杂交瘤细胞,接种BALB/c小鼠,收集合有单抗的腹水,用商品HiTrap IgM HP柱纯化腹水中的IgM抗体,并用L-半胱氨酸裂解IgM类M26-32单抗成单体IgM亚单位.经间接免疫荧光检定两种抗体的效价,并用胶体金标记,分别检测恶性疟原虫和间日疟原虫可溶性抗原.结果 接种20只小鼠,共采集约80 mL单抗腹水,经Hi-Trap IgM HP柱纯化,获得了纯度较高的M26-32单抗.经L-半胱氨酸裂解后,Native电泳显示天然IgM被裂解为单体亚单位,IFA结果显示,亚单位M26-32与天然五聚体IgM滴度无差别.经胶体金标记后,两种金标抗体均分别能检测1∶100稀释的恶性疟原虫和1∶10稀释的间日疟原虫可溶性抗原.结论 建立了L-半胱氨酸裂解IgM类M26-32单抗为单体IgM亚单位及其胶体金标记的方法,为利用M26-32进一步制备相应快速诊断工具奠定基础.

关键词：疟疾、单克隆抗体、M26-32、IgM、胶体金

所属期刊栏目：30

分类号：R382.3+1(医学寄生虫学)

资助基金：国家重大传染病防治科技重大专项2012ZX10004-220;安徽省高等学校省级自然科学研究重点项目KJ2012A200;卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室开放课题WK014-003;蚌埠医学院科技发展基金重点项目Bykf13A09;grants from the National S & T Major Program2012ZX10004-220;the Key Program of Natural Science Foundation of the Anhui Higher Education InstitutionsKJ2012A200;the Open Program of Key Laboratory on Technology for Parasitic Disease Prevention and Control of Chinese Ministry of HealthWK014-003;the Key Program of Bengbu Medical College Science and Technology Development FundBykf13A09

在线出版日期：2014-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：551-555,567