Heartland病毒血清学诊断方法的初步建立

摘要：

目的 初步建立Heartland病毒血清学诊断方法.方法 利用原核表达系统及杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达并纯化Heartland病毒核蛋白(Nucleocapsid protein,NP),通过间接免疫荧光法、间接ELISA法及基于Luminex技术的荧光微球法建立Heartland病毒核蛋白IgG抗体血清学检测方法,并利用原核系统表达纯化的Heartland NP所制备的兔免疫血清进行评价.结果 原核及真核两系统纯化后的Heartland病毒核蛋白经SDS-PAGE鉴定,均呈现单一蛋白条带,相对分子量约为25 kDa.Heartland NP兔免疫血清经间接免疫荧光检测,其IgG抗体滴度可达1:6 400;经间接ELISA法检测可达1∶409 600以上,经Luminex荧光微球法检测可达1∶4 096 000.上述3种方法检测EV 71 VP1兔免疫血清,均无明显非特异性反应.结论 本研究初步建立了3种Heartland病毒血清学诊断方法,需进一步完善以应用于实验室诊断.

关键词：Heartland病毒、荧光微球、血清学诊断

所属期刊栏目：30

分类号：R372(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：the China Mega-Project for Infectious Diseases-Construction of Emergency Response and Detection Platform for Infectious Disease No.2013ZX10004-101国家艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治项目:重大传染病应急处置检测技术平台No.2013ZX10004-101资助

在线出版日期：2014-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：444-447