猪链球菌真核样丝氨酸/苏氨酸激酶stk基因敲除株的构建

摘要：

目的 构建猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)2型强毒株05ZYH33真核样丝氨酸/苏氨酸激酶(eukaryoticlike Ser/Thr kinase,eSTK) stk基因敲除突变株.方法 构建中间为壮观霉素抗性基因(Spcr),两侧为stk编码基因上下游同源序列的基因敲除质粒,通过同源重组筛选stk编码基因敲除突变株.结果 组合PCR分析和基因测序结果均显示stk编码基因完全被壮观霉素抗性基因替代,基因敲除突变株△stk构建成功.逆转录PCR(RT-PCR)证实了stk在转录水平上的缺失.对筛选的突变株进行连续传代培养,证实△stk能够保持稳定的壮观霉素抗性表型.结论 stk基因敲除突变株的成功构建,为阐明该基因在猪链球菌致病过程中的作用奠定基础.

关键词：猪链球菌、真核样丝氨酸/苏氨酸激酶、基因敲除、突变株

所属期刊栏目：29

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：the National Natural Science Foundation of China81071317,81172794,31170124;the Natural Science Foundation of Jiangsu ProvinceNo.BK2011098,No.BK2011097,No.BK2012080国家自然科学基金81071317,81172794,31170124;江苏省自然科学基金项目BK2011098,BK2011097,BK2012080

在线出版日期：2014-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1162-1167