10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.12.001
粪肠球菌心内膜抗原efaA基因转化株的构建及其对生物膜形成的影响
目的 构建粪肠球菌心内膜炎抗原efaA基因转化株,探讨efaA基因在肠球菌生物膜形成及感染性心内膜炎致病中的作用.方法 PCR扩增粪肠球菌efaA基因,构建pAT28-efaA重组子,经PCR、双酶切及测序鉴定,将重组子转化到efaA野生株S14做为转化株(S14-pAT28-efaA);同时将空质粒pAT28转化到野生株作为对照株(S14-pAT28);IPTG诱导efaA表达,SDS-PAGE、Western Blot分析鉴定.微量滴定板法测定生物膜形成能力.将S14、S14 pAT28、S14-pAT28-efaA分别接种到96孔板,37℃培养24 h形成生物膜,结晶紫染色,测定孔板底部在595 nm的OD值,比较efaA基因转化前后的生物膜形成能力.结果 成功构建粪肠球菌心内膜炎抗原efaA基因转化株;转化株的OD595值大于野生株及空质粒转化株,P<0.05,空质粒转化株的OD595值与野生株比较差异无统计学意义,P>0.05.结论 粪肠球菌心内膜炎抗原efaA基因有利于肠球菌生物膜的形成.
粪肠球菌、粪肠球菌心内膜炎抗原efaA、转化、生物膜
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R378.1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
the Natural Science Foundation of Fujian Province No.2010J01172福建省自然科学基金2010J01172
2014-02-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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