10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.05.005
白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞与登革病毒相互作用蛋白的筛选
目的 筛选登革Ⅱ型病毒与白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞中的连接分子.方法 富集纯化登革Ⅱ型病毒,用12%SDS-PAGE分析提取的C6/36细胞膜蛋白和白纹伊蚊中肠组织总蛋白,将分离胶上的蛋白转于硝酸纤维素膜(PVDF)上,应用病毒覆盖蛋白结合试验(VOPBA)方法筛选白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞中表达连接登革Ⅱ型病毒的分子.结果 白纹伊蚊中肠组织总蛋白经12% SDS-PAGE分离后转膜,分别与纯化的病毒液和阴性对照液孵育,用抗登革病毒单克隆抗体检测,结果显示病毒孵育组在分子量30 kDa的位置有特异性的条带出现,而阴性对照组无此条带;用同样的方法筛选C6/36细胞上表达蛋白,病毒孵育组在分子量30 kDa和40 kDa的位置出现特异条带,而阴性对照组无.结论 VOPBA结果显示分子量为30 kDa的分子在中肠组织与C6/36细胞中都能表达,具有连接登革Ⅱ型病毒的作用,对其氨基酸序列的鉴定和功能分析工作正在进行中.
登革病毒、白纹伊蚊中肠、C6/36细胞、受体分子
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R373(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金30972566,81271880
2013-06-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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