SYBR GreenⅠ实时PCR检测甲型H1N1与季节性流感病毒方法的建立

摘要：

目的 建立一种检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法.方法 设计针对甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒HA基因的引物,分别进行SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应,同时进行熔解曲线和Tm值分析,并作灵敏度和重复性试验.结果 该方法与H5、H7、H9亚型流感病毒及副流感病毒1、2、3型均无交叉反应.构建的荧光定量标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为:95.588%,检测灵敏度为101 copies/反应体系,结果重现性好.成功地验证性检验了32份盲样标本.结论 本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法敏感、不需荧光标记探针、成本低及高通量,能用于人类流感病毒的分型检测.

关键词：甲型H1N1、实时荧光定量PCR、SYBR GreenⅠ

所属期刊栏目：29

分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：湖南省科技厅项目2011sk3260;湖南省出入境检验检疫局科技项目2009hnk001;长沙市科技局科技项目K0904150-11;中南大学研究生学位论文创新基金2011ssxt253

在线出版日期：2013-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：59-63