亚洲带绦虫六钩蚴Ta8基因的克隆表达及免疫原性分析

摘要：

目的 原核克隆表达亚洲带绦虫六钩蚴8 kDa基因(Ta 8),探索其表达蛋白在检测亚洲带绦虫感染中的应用价值.方法 用RT-PCR方法 从亚洲带绦虫六钩蚴cDNA中获取Ta 8基因,克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物通过SDS-PAGE进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹进行免疫学分析.结果 PCR、双酶切及DNA测序结果 均表明pET-28a(+)-Ta 8重组质粒构建成功.SDS-PAGE结果 表明目的 基因在大肠埃希菌BL21/DE3中获得高效表达,亲和层析获得了高纯度蛋白.重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别但不能够被正常大鼠血清识别,表明其具有免疫原性.结论 成功地构建了亚洲带绦虫六钩蚴8 kDa基因重组质粒,在大肠埃希菌BL21/DE3中获得了成功表达;证明了8 kDa基因表达产物具有免疫原性;还发现该绦虫成虫的头节、成节、孕节中也存在8 kDa基因.

关键词：亚洲带绦虫、六钩蚴、基因克隆、原核表达、免疫原性

所属期刊栏目：28

分类号：R383(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30760227;贵州省科技攻关项目[黔科合NY字20083060]联合资助

在线出版日期：2013-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1102-1106