粪肠球菌TLME3株AceA基因的克隆和序列分析

摘要：

目的 了解粪肠球菌胶原黏附素A(AceA)基因及其编码蛋白的遗传变异情况,为筛选动物粪肠球菌性传染病诊断及保护性抗原基因奠定基础.方法 根据粪肠球菌B 343/TX2783株AceA基因序列设计引物,对粪肠球菌TLME3株总DNA进行PCR扩增,产物经胶回收试剂盒纯化回收,与pMD18- T连接,转化入E.coli DH5α感受态细胞中,筛选阳性克隆进行测序.使用Lasergene7.0、BLAST、MEGA 4.0等生物学软件,对克隆基因及其编码蛋白进行序列分析并生成系统进化发育树,计算基因核苷酸及编码氨基酸的变异率.结果 成功克隆了粪肠球菌TLME3株AceA基因,阅读框为918bp.与BLASTn和BLASTp搜索出的58个核苷酸和84个氨基酸同源序列的同源性均为96％～100％,氨基酸变异率为1.63％.结论 TLME3 AceA基因很保守,可以作为动物粪肠球菌性传染病诊断及保护性抗原候选基因.

关键词：粪肠球菌、AceA、基因克隆、序列分析、系统进化发育树、诊断抗原、保护性抗原

所属期刊栏目：28

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：内蒙古自治区自然科学基金200607010418;内蒙古自治区高等学校科学研究项目NJ05077

在线出版日期：2012-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：837-840