基于TaqMan探针的猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒实时荧光定量PCR方法的建立

摘要：

目的 建立一种能检测猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(PRRSV)的TaqMan探针荧光定量PCR方法.方法 根据PRRSV的ORF7基因保守区的核苷酸序列设计引物和TaqMan探针,通过探针浓度的优化,建立检测PRRSV的TaqMan探针荧光定量PCR方法.用该方法对30份临床疑似病料进行检测,并与常规RT-PCR方法和病毒分离方法进行比较.结果 TaqMan荧光PCR检测PRRSV的最佳探针浓度为0.4 μmol,检测灵敏度可达3.51拷贝／μL.检测的30份样品与病毒分离结果的符合率为100％,与普通PCR的检测结果(25/30)比较,本方法对临床样品的检出率(28/30)更高.结论 建立的方法特异性强、敏感性高、重复性好,可用于临床样品的检测.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、ORF7基因、TaqMan荧光定量PCR

所属期刊栏目：28

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目GNSW-2009-10

在线出版日期：2012-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：579-582,596