蓝氏贾第鞭毛虫α-7.1、α-11贾第素的原核表达及抗原活性鉴定

摘要：

目的 原核表达蓝氏贾第鞭毛虫的α-7.1、α-11贾第素蛋白.方法 经RT-PCR获得α-7.1、α-11贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-7.1及pET-28a(+)-α-11,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3).IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测.结果 成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-7.1和 pET-28a(+)-α-11,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约43kD和35kD的位置分别出现目的 蛋白条带,与理论值相符;通过相应α-7.1、α-11贾第素抗血清的Western blot证实两种贾第素重组蛋白的抗原活性良好;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-7.1、α-11贾第素融合蛋白.结论 成功地克隆、表达并纯化了具有良好抗原活性的α-7.1、α-11贾第素蛋白.

关键词：蓝氏贾第鞭毛虫、α-7.1贾第素、α-11贾第素、原核表达

所属期刊栏目：28

分类号：R382(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30970313;河北省科技厅项目07276101D-68

在线出版日期：2012-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：474-478