甲型H1N1流感病毒HA基因与沙门菌fljB基因的融合表达与鉴定

摘要：

目的 研发基于鞭毛蛋白的新型甲型H1N1流感疫苗.方法 分别以鼠伤寒沙门菌SL7202基因组和含有甲型H1N1流感病毒HA基因的重组质粒pET-HA为模板,通过PCR扩增Ⅱ相鞭毛蛋白fljB和HA1-2基因,再通过overlap PCR将这两基因片段拼接成HA1-2-fljB,将其插入原核表达质粒pET30a(+),构建重组质粒pET-HA1-2-fljB,并转化表达宿主菌E.coli BL21 (DE3)中,以IPTG诱导表达.SDS-PAGE和Western blotting鉴定融合蛋白HA1-2-fljB的表达.结果正确构建出重组质粒pET-HA1-2-fljB,SDS-PAGE和Western blotting结果显示,融合蛋白分子量约84 kD,并具有良好的免疫反应性,能强烈诱导HEK293-mTLR5细胞分泌IL-8.结论 成功表达具有TLR5生物学活性的融合蛋白HA1-2-fljB,为研究甲型H1N1流感疫苗奠定了基础.

关键词：鞭毛蛋白、血凝素、原核表达、疫苗

所属期刊栏目：28

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学自然基金项目30871860, 31172299;江苏省自然科学基金项目BK2010039;江苏省青蓝工程项目联合资助苏教师200830号;江苏省2011年度普通高校研究生科研创新计划项目CXLX11 0999

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：19-23