TaqMan-MGB荧光定量PCR快速检测结核分枝杆菌katG基因突变

摘要：

目的 建立一种特异、灵敏、快速检测结核分枝杆菌katG基因突变的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法.方法根据结核分枝杆菌katG基因315位点突变的特点,设计一对特异性TaqMan-MGB探针和引物,通过反应条件优化,建立荧光定量PCR方法；用克隆到PMD18-T载体上katG基因阳性标准品及不同菌株来评价该方法的特异性、敏感性和重复性.结果 灵敏度高,检测目的基因的最低检测下限10 copies/μL,比常规PCR灵敏高100倍；特异性高,检测16株非结核分枝杆菌标准株和7种常见呼吸道感染细菌的标准株均为阴性；与测序法相比,野生型和突变型探针的敏感性和特异性均为100％.重复性好,批内批间CT值变异系数均小于1％.结论 TaqMan-MGB荧光定量PCR的方法能特异、灵敏、快速检测结核杆菌菌株katG 315位点突变.

关键词：结核分枝杆菌、katG基因、TaqMan-MGB荧光定量PCR

所属期刊栏目：28

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家"十一五"重大传染病防治科技重大专项2008ZX100/03-010-02

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：14-18,23