10.3969/j.issn.1002-2694.2011.11.017
抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ单克隆抗体的制备与鉴定
目的 制备并鉴定鼠源抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb).方法 重组Der fⅡ蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠免疫脾细胞与NS-1细胞融合.间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞.用筛选获得的单克隆细胞株诱生小鼠腹水,蛋白G亲和层析法纯化腹水抗体.利用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting方法鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性.结果 获得5株IgG2a型鼠抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ的单克隆抗体,效价良好.ELISA和Western Blotting分析表明该5株单抗均可识别重组Der fⅡ蛋白和天然粉尘螨提取物.结论 成功制备了5株鼠抗粉尘螨主要变应原Der fⅡ的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Der fⅡ的检测及纯化方法奠定了基础.
Der fⅡ、粉尘螨、主要变应原、单克隆抗体、特性鉴定
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R384.9(医学寄生虫学)
国家863计划项目2006AA02A231;国家自然科学基金810713788;粤港关键领域重点突破项目20054982207
2012-01-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1021-1023,1034