SV40LT基因重组腺病毒载体的包装、鉴定及用于转染日本血吸虫童虫细胞的研究

摘要：

目的 构建携带SV40LT基因的重组腺病毒表达载体,制备具有感染力的重组腺病毒,观察其转染日本血吸虫(Schistosoma ja ponicum,Sj)童虫细胞后的表达情况.方法 采用体外连接法构建好的携带SV40LT基因的重组腺病毒质粒(AdHu5-SV40LT)转化Stbl2感受态菌,获得重组腺病毒质粒后,经Pac Ⅰ酶切线性化后转染293A细胞,获得出重组腺病毒(AdHu5-SV40LT).将重组腺病毒感染Sj童虫细胞,采用RT-PCR和免疫组织化学检测SV40LT基因的表达情况.结果 重组腺病毒载体质粒可转染293A细胞并可在293A细胞内进行有效的复制；提取病毒DNA进行PCR检测证实含有SV40LT目的基因.以重组腺病毒能感染Sj童虫细胞,经RT-PCR和免疫组化检测有SV40LT基因在细胞中的表达.结论 成功包装了具有感染能力的含SV40LT基因的重组腺病毒,感染Sj童虫细胞后目的基因有表达,为进一步探索日本血吸虫细胞永生化提供了实验依据.

关键词：SV40LT基因、腺病毒载体、日本血吸虫、童虫细胞

所属期刊栏目：27

分类号：R383.2(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30570952

在线出版日期：2012-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1016-1020