应用免疫蛋白质组学方法鉴定日本血吸虫虫卵诊断抗原

摘要：

目的 虫卵可溶性抗原(soluble egg antigen,SEA)是目前日本血吸虫病免疫诊断中最常用的抗原.本研究联合应用双向凝胶电泳(2-DE)、Western blot和MALDI-TOF质谱等技术,鉴定SEA中诊断抗原蛋白质.方法 SEA经2-DE分离蛋白质后进行银染,或应用日本血吸虫感染兔血清Western blot筛选抗原蛋白点,用MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定每一抗原蛋白质分子.结果 虫卵可溶性蛋白分子经2-DE分离后转印PVDF膜上,与感染兔血清孵育出现29个特异性阳性反应点,与健康兔血清出现3个非特异的阳性反应点；29个特异性抗阳性反应点中,从银染2-DE胶图上找到21个匹配的抗原蛋白质点;MALDI-TOF/TOF质谱鉴定和NCBI数据库检索,13个点(61.9％)获得匹配蛋白质,4个点(19.0％)获得匹配EST,4个点(19.0％)未能从数据库中找到相匹配的信息.重组表达筛选出的SjCHGC06040和SjP40两个抗原蛋白质,Western blot结果显示reSjCHGC06040、reSjP40均能与感染兔血清抗体发生特异性反应,具有潜在的应用价值.结论 2-DE、MALDI-TOF质谱联合Western blot的免疫蛋白质组学研究方法,用于筛选、鉴定SEA中诊断抗原蛋白质,是切实可行的；但该方法存在一定的局限性,有待进一步改进.

关键词：日本血吸虫、虫卵可溶性抗原、免疫蛋白质组学

所属期刊栏目：27

分类号：R383.2(医学寄生虫学)

资助基金：浙江省科技厅专项基金2007F10029

在线出版日期：2011-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：861-865,881