乙型脑炎病毒NS5蛋白原核表达与亚细胞定位研究

摘要：

目的 对乙型脑炎病毒NS5蛋白进行原核表达和亚细胞定位研究.方法 通过PCR扩增乙型脑炎病毒NS5基因,并将之克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建的重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞,经IPTG诱导表达目的蛋白.将表达产物纯化后,免疫BALB/c小鼠,制备NS5蛋白特异性的多克隆抗体.同时,构建NS5基因与绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的真核表达质粒pcDNA-NS5-EGFP,将之转染BHK-21细胞,利用激光共聚焦荧光显微镜观察NS5蛋白在BHK-21细胞中的亚细胞定位.结果 NS5蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,表达蛋白分子量大小约为103kD,该蛋白在真核细胞中的表达呈颗粒状不均匀分布于整个细胞,且颗粒状主要分布在细胞质中.结论 成功表达乙型脑炎病毒NS5蛋白,并对NS5蛋白的亚细胞定位进行了分析,为进一步研究NS5蛋白提供依据.

关键词：NS5、原核表达、亚细胞定位、乙型脑炎病毒

所属期刊栏目：27

分类号：R373.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：778-782