铜绿假单胞菌重组Bb-OprF疫苗构建及鉴定

摘要：

目的 构建和鉴定铜绿假单胞菌重组双歧杆菌(rBb)-OprF疫苗.方法 以铜绿假单胞菌PAOl标准株提取总RNA为模板,自行设计引物,RT-PCR扩增获得OprF抗原编码基因,经酶切、连接定向克隆入大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-OprF.转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,抽提质粒行酶切电泳和测序验证后,电穿孔转化到Bb中,构建铜绿假单胞菌rBb-OprF疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定.结果 RT-PCR扩增出1 016bp的OprF编码基因;重组质粒经双酶切鉴定,切出4 947bp的载体片段和10 16bp的目的基因片段;以rBb抽提质粒为模板进行PCR扩增可得到1 016bp的oprF基因片段.结论 成功构建了铜绿假单胞菌rBb-OprF疫苗,为该疫苗的进一步研究奠定基础.

关键词：铜绿假单胞菌、OprF、疫苗

所属期刊栏目：27

分类号：R378.99(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：重庆市科委地方病重大专项基金2008AB5055、2008AA5008和2008AB5054

在线出版日期：2011-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：303-306