应用免疫磁珠分离法及荧光定量 PCR技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7

摘要：

目的 建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(real-time PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法.方法 根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfbEO157设计引物和荧光探针,建立real-time PCR 检测体系,并检测其特异性及敏感性;用O157免疫磁珠特异性捕获标本菌液中的O157∶H7大肠埃希菌,结合real-time PCR对磁珠捕获菌细胞的DNA进行检测分析.结果 Real-time PCR检测结果显示,O157∶H7大肠埃希菌可产生荧光信号,而其他常见致病菌均未见明显荧光信号;采用IMS-real-time PCR方法检测标本,菌液含菌量为3.3×102 CFU/mL时即可被检出,检测全过程需时约4h.结论 IMS-real-time PCR检测方法具有特异性强、敏感度高、快速易操作等特点,该检测方法能提高O157∶H7大肠埃希菌的检出率和准确性,可用于标本的快速诊断、疾病监测和暴发疫情的病原学调查.

关键词：免疫磁珠分离法、荧光定量PCR、大肠埃希菌O157∶H7

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分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家"艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项2009ZX10004-101资助

在线出版日期：2011-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：291-293,315