10.3969/j.issn.1002-2694.2011.02.009
结核分枝杆菌培养滤液蛋白21(CFP21)的基因克隆、表达及纯化
目的 构建结核分枝杆菌培养滤液蛋白21(Culture filtrate protein 21,CFP21)原核表达载体,获得CFP21蛋白.方法 以结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,PCR扩增cfp21基因.质粒PET28a(+)为表达载体,构建PET28a(+)/cfp21质粒,转化入大肠埃希菌DH5a中,抽提质粒,PCR扩增,测序,转化到大肠埃希菌BL21中,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析,并用His Bind蛋白纯化试剂金纯化CFP21.结果 构建、表达和纯化了CFP21,分子量约为24kD,主要以包涵体形式存在.结论 目的 基因克隆入宿主菌中并表达成功,纯化得到CFP21蛋白,为CFP21的进一步研究奠定基础.
结核分枝杆菌、CFP21、基因克隆、蛋白表达、纯化
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R378(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
卫生部艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项2008zx100030135;教育部"国家大学生创新性实验计划"项目资助081073017
2011-04-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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