狂犬病病毒核酸RT-LAMP检测方法的建立

摘要：

目的 建立RT-LAMP方法,实现对狂犬病病毒核酸的快速、灵敏、简便的检测.方法 针对狂犬病病毒的核衣壳蛋白基因(N基因)和大转录酶蛋白基因(L基因)中的高度保守区段分别设计了一套引物,建立了检测狂犬病病毒的快速一步式反转录～环介导恒温扩增(RT-LAMP)方法.样品提取总RNA后,加入BstDNA聚合酶、各种反应成分,于63℃恒温水浴箱中放置60min,80℃5min终止反应,加入荧光染料SYBR GREEN I,根据颜色变化肉眼判定结果.结果 两套引物对狂犬病病毒RNA进行RT-LAMP检测,均有良好的特异性,灵敏度均比RT-巢式PCR高10倍以上.结论 该方法简单、快速,不需电泳,利用染色剂肉眼判定结果,不需要大型仪器,能在70min内完成对狂犬病病毒RNA的检测,适用于可疑动物的快速检测,尤其适合基层使用.

关键词：狂犬病病毒、RT-LAMP、检测

所属期刊栏目：27

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家"863"项目2006AA022456;农业部行业专项200803014;广东省科技厅社会发展项目20098030803047

在线出版日期：2011-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：108-111