抗旋毛虫肌幼虫ES抗原IgY的制备及鉴定

摘要：

目的 制备抗旋毛虫肌幼虫排泄-分泌(excretory- secretory, ES)抗原的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),测定其效价及用于检测抗原的敏感性.方法 4只24 w龄罗曼母鸡用旋毛虫肌幼虫ES抗原经大腿外侧与胸部肌肉免疫4次(首次剂量为500μg/只,加强剂量为250μg/只),每次间隔 10d.取免疫前和首次免疫后42d的鸡蛋卵黄,用水稀释法提取IgY,考马斯亮蓝法测定蛋白含量,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹(Western blot)及间接荧光抗体试验(IFAT)对IgY进行分析,ELISA检测纯化后IgY的效价及检测抗原的敏感性.结果 罗曼鸡经ES抗原免疫后,每枚鸡蛋经提纯后均可得到约70mg抗体,SDS-PAGE表明纯化的IgY有2条主要蛋白带,分子量为67kDa、23 kDa,Western blot与IFAT发现提纯的IgY可识别肌幼虫虫体与ES抗原.IgY的抗体效价为1∶107,IgY-夹心ELISA检测旋毛虫抗原的敏感性为1.17ng/mL.结论 制备的抗旋毛虫ES抗原的IgY具有较高的效价与敏感性.

关键词：旋毛虫、IgY、排泄分泌抗原、血清学诊断、循环抗原

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分类号：R383.15(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30972492;河南省重大公益性科研项目2008-145

在线出版日期：2010-12-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1028-1031,1047