甲型H1N1流感病毒HA基因的原核表达及免疫反应性分析

摘要：

目的 构建甲型H1N1流感病毒HA基因的原核表达质粒,获得融合表达蛋白,并对表达蛋白的免疫反应性进行分析.方法 人工合成A/California/05/2009 H1N1流感病毒的HA基因,以合成基因为模板,通过PCR方法 扩增出去除信号肽的HA部分基因片段,然后将去除信号肽的HA基因克隆至pET30a(+)原核表达载体中,构建出原核表达质粒,再将重组质粒转化E.coli BL21(DE3)表达菌株;重组菌经IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳分析,Western blot分析表达产物的免疫反应性.结果 获得了HA基因的原核表达重组菌,细菌经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见约67.4 ku大小的目的 蛋白表达条带,Western blot结果 显示,表达产物与人甲型H1N1流感患者阳性血清具有反应性.结论 成功表达出甲型H1N1流感病毒的HA蛋白,该蛋白具有良好的免疫反应性,为甲型H1N1流感的快速诊断方法 的建立提供了生物材料.

关键词：甲型 H1N1 流感病毒、血凝素、原核表达、免疫反应性

所属期刊栏目：26

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学自然基金项目30871860;江苏省自然科学基金项目BK2008011;江苏省青蓝工程项目联合资助

在线出版日期：2010-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：923-925,948