10.3969/j.issn.1002-2694.2010.10.008
重组结核分枝杆菌RpfE蛋白对BCG休眠菌的促生长作用
目的 观察重组结核分枝杆菌RpfE蛋白对BCG的促生长作用.方法 将测序正确的Rv2450c基因克隆到表达载体pET32a(+)中,获得RpfE蛋白,在变性条件下对目的 蛋白进行亲和层析纯化.将纯化的蛋白分别与结核病人血清,Rpf单抗和Rpf结构域单抗进行Western blot分析.分别将10pmol/L和100pmol/L的RpfE加入到休眠BCG的培养基中,观察RpfE蛋白对BCG的促生长作用.结果 得到融合组氨酸残基的重组RpfE蛋白,Western blot结果 显示该蛋白分别与活动期结核病人血清,Rpf单抗和Rpf结构域单抗在40kDa处发生反应.100pmol/L的RpfE蛋白对BCG休眠菌具有明显的复苏和促生长作用.结论 构建了Mtb Rv2450c基因的重组表达载体,纯化获得了RpfE重组蛋白,该蛋白对BCG休眠菌具有复苏和促生长作用.
结核分枝杆菌、RpfE、休眠菌、促生长作用
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S378.9(农产品收获、加工及贮藏)
国家"863"专项课题2007AA02Z473;国家自然科学基金30972767;陕西省自然科学基金SJ08C203
2010-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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