标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中主要变应原Der f 2含量测定

摘要：

目的 研制粉尘螨Ⅱ组变应原Derf 2单克隆抗体(Monoclonal Antibody, McAb),并建立双单抗夹心ELISA检测方法,测定标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中Der f 2的含量.方法 应用基因工程方法获得粉尘螨变应原Der f 2重组蛋白并通过亲和层析纯化,再免疫小鼠,利用间接ELISA筛选获得McAb杂交瘤细胞株并纯化、鉴定抗体的特异性;用一株单抗包被酶标板,同时用生物素标记另一株单抗,从而建立双单抗体夹心ELISA法;并用此法测定粉尘螨变应原脱敏疫苗中Der f 2的含量.结果 成功地获得了一株单抗3B12与屋尘螨抗原具有交叉反应,另外一株单抗3G7与屋尘螨抗原没有交叉反应,并建立了双单抗夹心ELISA 方法测定Der f 2的含量,其方法的检测限为0.5ng/mL,并在6.25ng/mL-300ng/mL范围内线性良好;标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中Der f 2的含量为100ng/10000BAU.结论 成功制备了高效价抗Der f 2 单抗,并建立了双抗体夹心ELISA检测方法.该方法具有很高的灵敏度,可以测定标准化粉尘螨变应原脱敏疫苗中主要变应原Der f 2含量,为临床应用奠定基础.

关键词：尘螨过敏原、Der f 2、单克隆抗体、夹心ELISA

所属期刊栏目：26

分类号：R384.4(医学寄生虫学)

资助基金：国家"863"专题2006AA02A231;粤港关键领域重点突破项目20054982207

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：663-667