肠出血性大肠埃希菌O157:H7环介导恒温扩增快速检测方法的建立与应用

摘要：

目的 肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli, EHEC)O157:H7是一种重要的人畜共患病致病菌,主要通过被污染的食物传播,引起出血性结肠炎,建立其快速检测方法具有重要意义.方法 基于EHEC O157:H7 保守的rfbE基因序列,设计4条引物,利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),成功建立了EHEC O157:H7 LAMP快速检测方法,60 min内即可完成致病菌检测.结果 利用该LAMP方法对30种共38株细菌进行检测,所试EHEC O157:H7均为阳性结果,说明该方法具有高度特异性.本方法对纯培养的EHEC O157:H7检测限为12CFU/mL,污染食品中EHEC O157:H7的检测限为18 CFU/g.实践应用表明,对1 121份进出口肉类、奶类制品及人工污染样品等进行检测,检出57份LAMP阳性,与采用AOAC标准检测结果的符合率为100%.结论 该LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性.

关键词：肠出血性大肠埃希菌O157:H7、rfbE基因、环介导恒温扩增、快速检测

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分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家质检总局科技计划项目2008IK162;黑龙江省博士后基金LBH-Z09

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：618-623