检测水体日本血吸虫毛蚴PCR方法的建立

摘要：

目的 建立一种灵敏、特异的痕量检测日本血吸虫毛蚴的PCR方法.方法 取感染6~8w日本血吸虫的小鼠肝脏, 碾磨后沉淀, 孵化并利用间接连续离心法富集毛蚴,采用蛋白酶K-苯酚法提取毛蚴基因组DNA.登陆GenBank查询获得日本血吸虫保守序列18S小亚基单位核糖体脱氧核酸(18S rDNA)基因, 利用引物设计软件Primer Premier 5.0和Oligo 6自主设计一对引物,建立检测日本血吸虫毛蚴的PCR方法.梯度稀释血吸虫毛蚴基因组DNA进行PCR方法的灵敏性试验,设置阴性对照,PCR产物通过电泳鉴定.结果 PCR扩增日本血吸虫毛蚴得到特异性DNA片段,片段长度为463bp,阴性对照组无扩增产物.PCR法可检测出日本血吸虫毛蚴DNA的最低浓度为62.5 pg/μL.结论 建立的检测日本血吸虫毛蚴PCR方法灵敏、特异,具有一定的预警作用.

关键词：日本血吸虫、毛蚴、PCR、痕量检测、预警

所属期刊栏目：26

分类号：R383.2(医学寄生虫学)

资助基金：江苏省自然科学基金BK2009076

在线出版日期：2010-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：562-564