广州管圆线虫ASP基因的克隆及原核表达

摘要：

目的 对广州管圆线虫ASP基因的完整开放读码框进行克隆、表达及重组蛋白的免疫性分析.方法 以广州管圆线虫幼虫cDNA文库中含有ASP基因的质粒为模板,扩增目的 基因,进一步将其克隆到原核表达质粒pET-30a(+)中, 重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达, Ni-IDA亲和层析纯化表达产物.免疫印迹(Western blotting)分析重组蛋白的免疫性.结果 广州管圆线虫ASP基因的编码区含有366个碱基,编码121个氨基酸,相对分子量(Mt)为13 398.26Da.重组质粒pET-30a(+)-ASP构建成功,IPTG诱导获得可溶性表达的重组蛋白,经亲和层析获得的纯化蛋白可被广州管圆线虫病人血清识别. 结论广州管圆线虫ASP基因可在原核表达系统中获得具有免疫性的高效表达.

关键词：广州管圆线虫、天冬氨酸蛋白酶、基因克隆、原核表达、免疫性

所属期刊栏目：26

分类号：R383.1(医学寄生虫学)

资助基金：广州市科技局2005 23-C7561、2006 Z3-C7191;国家自然科学基金-广东省人民政府联合基金U0632003

在线出版日期：2010-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：471-474