日本血吸虫TβRII样基因胞外段的克隆、表达及初步鉴定

摘要：

目的 获得日本血吸虫TGF-β受体II(TβRII)样基因的cDNA 完整序列,克隆、原核表达其胞外段蛋白序列,并进行初步免疫学分析.方法 应用RACE方法获得SjTβRII样基因cDNA全长序列,构建其胞外段(即N端)原核表达载体,在大肠埃希菌中IPTG诱导表达,表达产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析.纯化重组蛋白并免疫大鼠制备抗血清,应用Western Blotting方法初步鉴定重组蛋白.结果 获得日本血吸虫SjTβRII样基因的cDNA全长序列,为2 283bp,编码760个氨基酸,其中胞外段长531bp,编码177个氨基酸.构建的重组质粒在大肠埃希菌中成功表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白.重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别,表明其具有免疫原性和抗原性.结论 首次获得日本血吸虫TβRII样基因的cDNA全长序列,其胞外段可在原核表达系统中获得具有免疫原性和抗原性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.

关键词：日本血吸虫、SjTβRII、克隆、基因表达

所属期刊栏目：26

分类号：R383.2(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30600516

在线出版日期：2010-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：356-359