变形链球菌重组表面蛋白(rA-P)人源单链抗体的筛选及其活性检测

摘要：

目的 从PDNA5噬菌体抗体库中筛选变形链球菌重组表面蛋白的人源噬菌体单链抗体,将其表达制备非融合单链抗体,并探讨其生物学特性.方法 用变形链球菌重组表面蛋白rA-P包被免疫试管,对pDAN5噬菌体抗体库进行5轮亲和免疫筛选制备抗rA-P蛋白的噬菌体单链抗体,并将其感染大肠杆菌HB2151,用IPTG诱导表达非融合性单链抗体,非融合性单链抗体包涵体复性后用Western blot检测其生物活性.结果 筛选得到13株抗rA-P蛋白的噬菌体单链抗体;用HB2151表达的非融合性单链抗体分子量为30kD,表达量达菌体蛋白的30%,Western blot检测显示,复性后的非融合性单链抗体能与rA-P蛋白发生特异性抗原抗体反应,证明表达的非融合性单链抗体有生物活性.结论 成功地利用噬菌体抗体库技术筛选、表达制备有生物活性的抗变链菌表面蛋白的人源单链抗体.

关键词：变形链球菌、重组表面蛋白、噬菌体抗体库、单链抗体

所属期刊栏目：26

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家发改委生物技术产业化专项基金计高技[2002]1454号

在线出版日期：2010-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：201-204,208