牛分枝杆菌Mb2277蛋白的表达及其反应原性初步研究

摘要：

目的 构建牛分枝杆菌 Mb2277基因的原核表达载体,获得高纯度的融合表达蛋白,并对其表达产物的免疫原性进行初步研究.方法 根据GenBank提供的M. Bovis Mb2277基因序列设计引物.以牛分枝杆菌(93006)DNA为模板,通过PCR方法扩增出Mb2277基因片段,以BamHⅠ和EcoR Ⅰ双酶切PCR产物和pET28a(+),后将纯化的Mb2277基因克隆至pET28a(+)中,构建出原核表达质粒,再转化到E.coli BL21(DE3)表达菌株中, IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE,进一步利用Western Blot对表达产物的反应原性进行研究.结果 获得了牛结核分枝杆菌Mb2277原核表达质粒,IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析可见约25ku蛋白表达条带,Western Blot结果显示,表达产物与兔抗分枝杆菌抗体具有反应性.结论 该蛋白具有较强的反应原性.

关键词：牛分枝杆菌、分泌蛋白、Mb2277基因

所属期刊栏目：26

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：上海市自然科学基金项目04ZR14089;上海市西部合作项目055458023

在线出版日期：2010-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：33-35