微载体规模化培养MDCK细胞增殖H9N2亚型禽流感病毒的研究

摘要：

目的 探索H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)在微载体大规模培养的MDCK细胞中的增殖规律,确定最佳增殖条件.方法 将H9N2亚型禽流感病毒株接种到生长在24孔培养板上的MDCK细胞中进行增殖试验,检测接种不同感染剂量病毒、添加不同浓度TPCK-胰酶、在不同pH值的培养液中培养,接毒后不同时间的病毒血凝素滴度(HA).根据最佳增殖条件将病毒接种至生长在微载体上的MDCK细胞中,利用250mL和5L转瓶逐级进行大规模增殖.结果 最佳病毒增殖条件为TPCK-胰酶终浓度为10 μg/mL,接毒剂量为MOI=0.025,培养液pH值为7.4,在此条件下,H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)适应在250mL和5L转瓶中微载体培养的MDCK 细胞内大量增殖,病毒的最高血凝价均可达到9log_2(1:512).结论 本研究为以哺乳动物细胞为基质规模化生产禽流感疫苗奠定了基础.

关键词：微载体、H9N2亚型禽流感病毒、MDCK细胞、规模化培养

所属期刊栏目：25

分类号：Q939.91(微生物学)

资助基金：中国博士后基金20070410923;黑龙江省青年科学基金QC06C014;黑龙江省博士后基金LBH-Z06240;东北农业大学博士启动基金

在线出版日期：2010-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1149-1153