结核分枝杆菌14 000抗原基因的克隆、表达纯化及抗原性分析

摘要：

目的 对结核分枝杆菌14 000抗原基因进行克隆表达及纯化,并评价其抗原性.方法 以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,用PCR方法 获得目的 基因构建大肠杆菌高效表达株;亲和层析柱纯化重组蛋白;进SDS-PAGE电泳鉴定;通用ELISA法进行重组蛋白的抗原性检测分析.结果 获得了结核分枝杆菌抗原14 kD基因,在大肠杆菌BL21中高效表达,Western印迹结果 证实该重组蛋白能与抗结核分枝杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应.ELISA分析中,该纯化的重组抗原敏感性、特异性和准确性分别为: 52.5%、96.7%和67.2%,具有良好的抗原性和较高的特异性.结论 14 kD重组蛋白抗原具备良好的抗原性与特异性,为结核病诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测以及抗原、抗体的大规模制备打下基础.

关键词：结核分枝杆菌、抗原、14000蛋白、基因表达

所属期刊栏目：25

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2009-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：875-877