弓形虫MIC 6羧基端蛋白片段的表达及其多克隆抗体的制备

摘要：

目的 克隆表达刚地弓形虫微线体蛋白6羧基端蛋白片段(TgMIC6C),制备多克隆抗体.方法 PCR扩增目的 基因片段,克隆到pGEX-4T-1载体上,构建MIC6C/pGEX-4T-1原核表达系统;IPTG诱导表达GST-MIC6C融合蛋白,亲和层析融合蛋白;用纯化的融合蛋白混合免疫佐剂免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,纯化并分析抗体的特异性.结果 构建了MIC6C/pGEX-4T-1原核表达系统并获得纯化的GST-MIC6C融合蛋白;获得了抗目的 蛋白的多克隆抗体,抗体能特异地识别目的 蛋白,抗体效价为1∶8 000.结论 在体外获得了纯化的GST-MIC6C融合蛋白及其多克隆抗体,为后续GST pull-down筛选与MIC6相互作用的蛋白奠定了基础.

关键词：刚地弓形虫、微线体蛋白6、蛋白表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：25

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

在线出版日期：2009-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：870-874